公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
肺腺癌細胞;NCI-H1975 | 貼壁生長 | EY-X63935 |
細胞名稱 肺腺癌細胞;NCI-H1975
形態(tài)特性: 上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 人非小細胞肺癌細胞NCI-H1975建系于1988年7月,來源于一位不吸煙的女士。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法: 消化5分鐘。1:2。3-4天長滿。
傳代情況: P(23+5)
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
血紅蛋白E檢測試劑盒
-三苯基膦)氯化銨Human SOX6( SRY-box 6) ELISA Kit
雜交瘤株;F7-P-01注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用3,5-二氟苯磺酰氯Human SOX8 ELISA Kit
雜交瘤株;α-antitrypsin-P-01注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用3,5-二氟苯磺酰氯Human SOX7 ELISA Kit
小鼠肺;MML1拉丁屬名: Staphylococcus carnosus subsp. carnosus2-氯-4-氟苯Human SP100 ELISA Kit
小鼠胚胎成纖維;3T3-L1拉丁屬名: Mucor racemosus2-氯-4-氟苯Human SP110 ELISA Kit
雜交瘤株;WV-Vi-01用途: Degrades cellulose1-氟-2-(三氟甲氧基)苯Human ACTN3(Alpha-actinin-3) ELISA Kit
雜交瘤株;DT-03注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用1-氟-2-(三氟甲氧基)苯Human SOX13 ELISA Kit
雜交瘤株;WV-A-01用途: 與大翼豆共生固氮1-氟-2-(三氟甲氧基)苯Human SP2 ELISA Kit
雜交瘤株;WV-SPB-11拉丁屬名: Sandarakinorhabdus sp.2-氯-4-氟-1-Human SODD/BAG4 ELISA Kit
雜交瘤株;FLUA-1A5拉丁屬名: Chaetomium indicum2-氯-4-氟-1-Human SOCS6 ELISA Kit
雜交瘤株;7P1-11用途: 固氮2-氯-4-氟-1-Human AQPEP(Aminopeptidase Q) ELISA Kit
雜交瘤株;7P1-7注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用5,6-二甲氧基-1-茚酮Human Sodium iodide symporter ELISA Kit
雜交瘤株;12E6拉丁屬名: Bacillus subtilis5,6-二甲氧基-1-茚酮Human SORBS2 ELISA Kit
雜交瘤株;K3L35拉丁屬名: Penicillium glabrum3-(3,4-二甲氧基苯)酸Human SNRPD3 ELISA Kit
雜交瘤株;K3L25拉丁屬名: Aspergillus terreus var. terreus3-(3,4-二甲氧基苯)酸Human ACTN3(Alpha-actinin-3) ELISA Kit
雜交瘤株;11F10注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不肺腺癌細胞;NCI-H1975哈巴苷6926-08-5中文別名:哈帕苷; 哈帕甙; 瓜鉤草苷
英文名:Harpagide
CAS登錄號:6926-08-5
分子式:C15H24O10
分子量:364.14
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色針狀結(jié)晶
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:玄參科(Scrophulariaceae)植物玄參Scrophularia ningpoensis Hemsl.的干燥根
藥理藥效:抗菌;解熱;增加心肌營養(yǎng)性血流量,提高耐缺氧能力等。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。