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產(chǎn)品名稱 | 小香豬皮膚細(xì)胞;SSC-S2 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
貨號(hào) | EY-X63764 |
細(xì)胞名稱 小香豬皮膚細(xì)胞;SSC-S2
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性五指山小香豬的皮膚組織。2002年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法(-)
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產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
P21 WAF1;CIP1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BE(2)-M17形態(tài)特性: 神經(jīng)母細(xì)胞樣P21 WAF1;CIP1
p53自身抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人癌細(xì)胞;MDA-MB-157形態(tài)特性: 上皮樣P53-Ab
前顆粒體蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Progranulin
磷化tau—181蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)形態(tài)特性: 上皮樣;多角181P-tau
Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶5檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人成骨肉瘤細(xì)胞;MG-63形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 5
RNA結(jié)合基序蛋白6檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 大鼠垂體瘤細(xì)胞;MMQ形態(tài)特性: 上皮樣RNA binding motif protein 6
S100A11鈣結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H446形態(tài)特性: 上皮樣S100A11
S100A14鈣結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞;RPMI-8226[RPMI8826]形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣S100A14
S-100蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人腦瘤細(xì)胞;SF17形態(tài)特性: 其他Soluble protein-100
Salusinα蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-SH形態(tài)特性: 上皮樣Salusin α
SAX1蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人肝癌細(xì)胞;SMMC-7721形態(tài)特性: 上皮樣SAX1
Sestrin 2蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人羊膜細(xì)胞;WISH形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Sestrin 2
SPRED1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠淋巴瘤細(xì)胞(NK靶細(xì)胞);YAC-1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣SPRED1
STAT3蛋白抑制分子檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-1形態(tài)特性: 上皮樣Protein Inhibitor of Activated STAT, 3
TARDNA結(jié)合蛋白43檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人皮膚鱗癌細(xì)胞;A-431[A431]形態(tài)特性: 上皮樣TAR DNA binding protein 43
Twist相關(guān)蛋白1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣TWIST1
UL16結(jié)合蛋白-1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人低分化肺腺癌細(xì)胞;GLC-82[GLC82]形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣UL16 Binding Protein 1
小香豬皮膚細(xì)胞;SSC-S2肉湯基礎(chǔ)規(guī)格:250g用途:蠟樣芽孢桿菌試驗(yàn)
、中和劑管規(guī)格:9ml*20支/包用途:用于消劑的中和
致瀉大腸埃希氏菌生化套裝規(guī)格:8種*2套/盒*5盒用途:組成:三糖鐵瓊脂2支、蛋白胨水(色氨肉湯)2支、尿素酶2支、賴氨脫羧酶肉湯2支、氨基脫羧酶對(duì)照2支、化鉀實(shí)驗(yàn)生化管2支、化鉀實(shí)驗(yàn)用對(duì)照生化管2支、半固體瓊脂2支、無(wú)菌液體石蠟1支。
含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE)顆粒規(guī)格:300ml/袋*10用途:用于單增李氏菌增菌培養(yǎng)(SN、GB標(biāo)準(zhǔn))
0.85%無(wú)菌生理鹽水(9ml/支)規(guī)格:9ml*20支/包用途:用于樣品稀釋處理
藥敏紙片規(guī)格:200μg/片(含50μg/片的6-磷葡萄糖),20片/瓶拉丁屬名:Fosfomycin (FOS)