綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強,培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
短短芽孢桿菌規(guī)格 | Brevibacil | EY-J963454 |
資源名稱: 短短芽孢桿菌
種屬: Brevibacillus brevis
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 生物防治花生線蟲病
培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。
生長條件: 30℃,好氧,24h
存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
Cercospora│variicolor G. Winr 中文名稱:雜色尾孢Cercospora│variicolor G. Winr分離基物:牡丹葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:99%
Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 中文名稱:貝倫格葡萄座腔菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar分離基物:蘋果枝干提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:99%
Armillaria│borealis Marxm. & Korhonen 中文名稱:北方蜜環(huán)菌Armillaria│borealis Marxm. & Korhonen分離基物:樺樹提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:24存儲條件:定期移植法 純度:97%
Trichothecium│roseum (Pers.) Link 中文名稱:紅聚端孢霉Trichothecium│roseum (Pers.) Link分離基物:玫葉部提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97%
Prathoda│longissima (Deighton & MacGarvie) E.G. Simmons 中文名稱:長鏈格孢Prathoda│longissima (Deighton & MacGarvie) E.G. Simmons分離基物:玉米葉部提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97%
Lycoperdon│pusillum Batsch 中文名稱:馬勃Lycoperdon│pusillum Batsch提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:100 ng/ul 基體:乙
Leucoagaricus│leucothis (Vittad.) Wasser 中文名稱:純白環(huán)菇Leucoagaricus│leucothis (Vittad.) Wasser提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:99%
Alrnaria│cucumerina (Ellis & Everh.) J.A. Elliott 中文名稱:瓜鏈格孢Alrnaria│cucumerina (Ellis & Everh.) J.A. Elliott分離基物:黃瓜葉部提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:99%
短短芽孢桿菌規(guī)格Phospho-Cyclin B1 (Ser147) 磷化周期素B1抗體10-羥基癸烯5-溴-2-苯Human C4BP (C4 Binding Protein) ELISA Kit
Phospho-Cyclin B1 (Ser133) 磷化周期素B1抗體棗仁皂苷B5-溴-2-苯Human MUC13 (Mucin 13) ELISA Kit
Cyclin C 周期素C抗體?;悄戔c5-溴-2-苯Human CA724 (Tumor Marker CA724) ELISA Kit
Cyclin D1 周期素D1抗體?;切苋パ跄?-溴-5-苯Human MUC1 (Mucin 1) ELISA Kit
Phospho-Cyclin D1 (Thr286) 磷化cyclin D1抗體鹽川芎3-溴-5-苯Human CABIN1 (Calcineurin Binding Protein 1) ELISA Kit
Cyclin D2 周期素D2抗體紅景天苷3-溴-5-苯Human CaN (Calcineurin) ELISA Kit
Cyclin D3 周期素D3抗體牛蒡子苷(+)-2,2'-亞甲基雙[(3aR,8aS)-3a,8a-二氫-8H-茚苯[1,2-d]并惡唑Human CGRP (Calcitonin Gene Related Peptide) ELISA Kit
Cyclin E 周期素E抗體苦杏仁苷(+)-2,2'-亞甲基雙[(3aR,8aS)-3a,8a-二氫-8H-茚苯[1,2-d]并惡唑Human CTR (Calcitonin Receptor) ELISA Kit