資源名稱: 綠膿假單胞菌
種屬: Pseudomonas aeruginosa
分離基物: 病料
提供形式: 凍干管、試管斜面
安全等級(jí): 2
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 研究;分析檢測(cè)。2015版中國(guó)藥典質(zhì)控菌株。
培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,18-24h。營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g(液體培養(yǎng)基不含),蒸餾水 1.0L,pH7.0。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件: 37℃,好氧
生長(zhǎng)特性: 菌株在營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂培養(yǎng)基上,37℃,培養(yǎng)3d,菌體呈桿狀,0.61μm×1.22~2.13μm,革蘭氏陰性,不產(chǎn)芽胞。
存儲(chǔ)條件: 4℃,避光冷藏。
產(chǎn)品名稱 | 綠膿假單胞菌說(shuō)明書 |
英文名稱 | Pseudomona |
貨號(hào) | EY-J963296 |
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實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
1.稱量→溶化→調(diào)pH→過(guò)濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查
2.干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3.高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查
4.過(guò)濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無(wú)菌檢查→清洗滅菌
菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級(jí)種)、原種(二級(jí)種)和栽培種(三級(jí)種)三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的菌種,用無(wú)菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對(duì)于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
培養(yǎng)及打管說(shuō)明:
1、安瓿瓶開封:用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
Aquaspirillumsp. 中文名稱:螺菌Aquaspirillumsp.分離基物:filtraofslowsandfilrsfordrinkingwar,theHague,theNetherlands安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:assayofassimilableorganiccarbonAOC培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:20-25°C 純度:97%
Salmonella enrica subsp.enrica 中文名稱:腸炎沙門氏菌腸炎亞種Salmonella enrica subsp.enrica分離基物:tissue,animal提供形式:凍干安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:CoolCulturemediastingpreparatorystcool培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。生長(zhǎng)條件:30℃,好氧,24h,鏡檢為陰性短桿菌,純 純度:97%
Curtobacrium│flaccumfaciens 中文名稱:萎蔫短小桿菌Curtobacrium│flaccumfaciens分離基物:類農(nóng)藥農(nóng)田施用土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基:中添50mg/L的農(nóng)藥,對(duì)降解率達(dá)40%,用于教學(xué)或科研。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:98%
Shewanella│algae 中文名稱:海藻希瓦氏菌Shewanella│algae分離基物:海綿Myclae adhaerens 表面提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:pontial antifouling 潛在的抗污損活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:467生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
PontibacillusmarinusLimetal.2005 中文名稱:嗜鹽細(xì)菌屬PontibacillusmarinusLimetal.2005分離基物:solarsalrnsoil安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:78生長(zhǎng)條件:30°C 純度:98%
Comamonas stosrone 中文名稱:酮叢毛單胞菌Comamonas stosrone提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長(zhǎng)條件:30℃,好氧生長(zhǎng)特性革蘭氏陰性細(xì)菌,化能異養(yǎng),嚴(yán)格好氧。存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Novosphingobiumtardaugens 中文名稱:新鞘氨醇單胞菌Novosphingobiumtardaugens安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30℃ 純度:97%
Francisellaphilomiragia 中文名稱:蜃樓耶爾森氏菌Francisellaphilomiragia安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30℃ 純度:97%
綠膿假單胞菌說(shuō)明書Triple Sugar Iron Agar人成纖維細(xì)胞-新生兒總RNA釤(III)EBNA-3 (Epstein barr nuclear antigens 3) EB病編碼核蛋白-3
賴氨鐵瓊脂人成纖維細(xì)胞-總RNA4-羥基-3-苯甲甲酯ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗原
Lysine Iron Agar人毛細(xì)胞總RNA4-羥基-3-苯甲甲酯ECE2(Endothelin Converting Enzyme 2) 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗原
月桂胰胨肉湯人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞總RNA3-羥基-2-硝基吡ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白抗原
Lauryl Sulfate Broth人外根殼細(xì)胞總RNA3-羥基-2-硝基吡ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發(fā)育不良抗原
亮綠膽鹽肉湯人內(nèi)根殼細(xì)胞總RNA四(三苯基膦)鎳rhEGF(rh-Epidermal growth factor)
Brilliant Green Bile 2%人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞總RNA四(三苯基膦)鎳EGF(Epidermal growth factor)rat 重組表皮生長(zhǎng)因子抗原(大鼠)
EC肉湯人淋巴成纖維細(xì)胞總RNA2,6-二氟吡EGFL7(EGF-like domain containing protein 7) 類表皮生長(zhǎng)因子域7抗原