公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
猞猁皮膚成纖維樣細胞;ELS1 | 貼壁生長 | EY-X63798 |
細胞名稱 猞猁皮膚成纖維樣細胞;ELS1
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雄性猞猁的皮膚組織。2000年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)10%FBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P4
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
風疹病檢測試劑盒細胞名稱: 人鱗癌細胞(高分化);HCC-94[HCC941122;HCC94]形態(tài)特性: 上皮細胞樣rubella virus
粉塵螨特異性IgE4抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人結直腸腺癌細胞;LoVo形態(tài)特性: 上皮細胞specific IgE4 against dust mite antibody
狼瘡抗凝物檢測試劑盒細胞名稱: 人胸膜瘤細胞;SMC-1形態(tài)特性: 上皮細胞樣lupus anticoagulation
粉塵螨特異性IgG4抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人成巨核細胞白血病細胞;MEG-01形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣specific IgG4 against dust mite antibody
Ca-Mg-ATPase檢測試劑盒細胞名稱: 人結直腸腺癌細胞;SW480[SW480;SW-480]形態(tài)特性: 上皮樣Ca-Mg-ATPase
醋甲羥孕檢測試劑盒細胞名稱: 人導管癌細胞;T47D[T-47D]形態(tài)特性: 上皮細胞Medroxyprogesterone 17-acetate
塞卡病檢測試劑盒細胞名稱: 人骨肉瘤細胞;U-2OS[U2OS;U2-OS;U-2OS]形態(tài)特性: 上皮細胞Zika virus
細胞色素b5檢測試劑盒細胞名稱: 人胃癌細胞;MGC-803形態(tài)特性: 上皮細胞樣Cytochrome 5A
谷氨酰半胱氨連接酶催化亞基檢測試劑盒細胞名稱: 人食管癌細胞;TE-10形態(tài)特性: 上皮樣Glutamate--cysteine ligase catalytic subunit
磷化轉化生長因子β活化激酶結合蛋白3檢測試劑盒細胞名稱: 人食管癌細胞;TE-1形態(tài)特性: 上皮樣TGF-beta-activated kinase 1 and MAP3K7-binding protein 3
水痘-帶狀皰疹病檢測試劑盒細胞名稱: 人食管癌細胞;TE-11形態(tài)特性: 上皮樣Varicella-zoster virus
EB病早期抗原IgA檢測試劑盒細胞名稱: 人肺扁平上皮癌細胞;QG-56[QG56]形態(tài)特性: 上皮樣
蓖麻素抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人高轉移肝癌細胞;HCCLM3形態(tài)特性: 上皮細胞樣;胞質內有顆粒ricin antibody
β-乙型溶血性鏈球檢測試劑盒細胞名稱: 人癌細胞;BT-549形態(tài)特性: 上皮細胞β-GBS
SCETIN檢測試劑盒細胞名稱: 人膠質母細胞瘤細胞;A172形態(tài)特性: SCETIN
角化細胞生長因子2檢測試劑盒細胞名稱: 人T淋巴細胞白血病細胞;A3形態(tài)特性: 淋巴母細胞Keratinocyte Growth Factor 2
HA tag標簽檢測試劑盒細胞名稱: 人胰腺癌細胞;PANC-1形態(tài)特性: 上皮細胞樣HA tag
猞猁皮膚成纖維樣細胞;ELS1糖蜜素規(guī)格:1EA詳情介紹
M-腸道菌瓊脂規(guī)格:250g用途:用于水中或其它物質中腸球菌分離培養(yǎng)和計數(濾膜法或劃線法)
HBI副溶血性弧菌生化鑒定條(SN)規(guī)格:5條/盒用途:用于副溶血性弧菌的生化鑒定,每條包括:無鹽胨水、3%NaCl胰胨水、7%NaCl胰胨水、10%NaCl胰胨水、3%NaClVP半固體、賴氨脫羧酶、精氨脫羧酶、氨基脫羧酶對照、O/F試驗(2孔)、蔗糖發(fā)酵管、42℃生長共12種生化反應。(SN標準)
色氨肉湯規(guī)格:20支詳情介紹
Letheen瓊脂規(guī)格:250g用途:用于化妝品中微生物檢測
亞硫鐵多粘菌素B瓊脂規(guī)格:250g用途:用于羽絨羽毛中亞硫鹽還原梭狀芽孢桿菌的計數(GB 標準)
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。