公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL1 | 貼壁生長 | EY-X63793 |
細胞名稱 豹貓肺成纖維樣細胞;LCL1
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雌性豹貓的肺組織。1985年由中國科學(xué)院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)20%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
K-Ras檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞與大鼠膠質(zhì)瘤細胞之融合細胞;NG108-15[108CC15]形態(tài)特性: 扁平;圓形;10到100微米直徑K-Ras
nm23-H1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞CD25;PC615.3[PC61;PC61.5.3]形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣nm23-H1
溶組織阿米巴IgA檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;AE-1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Entamoeba histolytica Schaudinn IgA
丙型肝炎IgM抗體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;AE-2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Hepatitis C virus IgM
抗肌動蛋白抗體IgG檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞(抗人肺腺癌);LC-2-01形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣anti-Actin antibody IgG
4-羥基丙雙加氧酶檢測試劑盒細胞名稱: 中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤;MR1[derivativeofHB-11048]形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase
COP9結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;35.1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣COPS2
COP9結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2抗體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;OKT11形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣COPS2 antibody
RIG-I檢測試劑盒細胞名稱: 人腎透明細胞腺癌細胞;786-O[786-0]形態(tài)特性: 上皮細胞RIG-I
柯薩奇病B3檢測試劑盒細胞名稱: 人肺癌細胞;A549[A-549]形態(tài)特性: 上皮樣;多角形Coxsackie virus B3
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A2檢測試劑盒細胞名稱: 人惡性黑色素瘤細胞;A-375[A375]形態(tài)特性: 上皮樣DNA methyltransferase 3A2
雌激素受體γ檢測試劑盒細胞名稱: 人T淋巴細胞白血病細胞;6T-CEM形態(tài)特性: 淋巴母細胞Estrogen Receptorγ
酪氨氨基轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒細胞名稱: 人膀胱癌細胞;5637(HTB-9)形態(tài)特性: 上皮細胞tyrosine aminotransferase
血小板CD41-IgG抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人胃腺癌細胞;AGS形態(tài)特性: 上皮細胞PA-CD41IgG antibody
血小板相關(guān)IgG抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人橫紋肌肉瘤細胞;A-673[A673]形態(tài)特性: 成纖維細胞Platelet associated IgG antibody
胃脂酶檢測試劑盒細胞名稱: 人癌細胞;Bcap-37形態(tài)特性: 上皮細胞樣gastric lipase
干擾素-a-2b檢測試劑盒細胞名稱: 人胰腺癌細胞;AsPC-1形態(tài)特性: 上皮樣Interferon α-2b
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL1SCDLP液體培養(yǎng)基管規(guī)格:5ml*20支用途:用于化妝品的樣品制備以及前增菌
CAYE培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于致病性大腸埃希氏菌的分離培養(yǎng)基
酪蛋白胨大豆吐溫20培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于藥品(含防腐劑)的中和劑
/藥敏紙片 別名:復(fù)方新諾明規(guī)格:23.75ug/1.25ug/片,20片/瓶拉丁屬名:Trimethoprim/Sulfamethoxazole(SXT)
藥敏紙片規(guī)格:30μg/片,20片/瓶拉丁屬名:Aztreonam(AZT)
乳酚棉藍染色液規(guī)格:5ml*8用途:用于真菌染色
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。