公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號(hào) |
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1 | 貼壁生長 | EY-X64055 |
細(xì)胞名稱 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1
形態(tài)特性: 樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 裸鼠移植實(shí)驗(yàn)證明可向三個(gè)胚層分化。
培養(yǎng)條件: KO-DMEM+15%FBS+103U/mlLIF+2mML-Glu+1%NEAA+0.1Mβ-Mer
傳代方法: 1:10傳代;3~4天傳代一次
傳代情況:
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
神經(jīng)鞘氨醇磷膽檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長,聚團(tuán)培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSSphingosylphosphorylcholine
神經(jīng)絲蛋白200檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;0.05mM基乙醇Neurofilament
神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白1檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長,聚團(tuán),少數(shù)貼壁培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSNinjurin 1
神經(jīng)肽A檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSNeurokinin A
神經(jīng)肽B檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)20%FBSNeurokinin B
神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSNCAM-1;CD56
神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;0.1mMMEMNon-Essential+AminoAcids(NEAA)+2mML-glutamine+1%Pen-Strep(optional)+500?g/mlGeneticinNeuralcelladhesionmoleculeligand1
神經(jīng)元微管相關(guān)蛋白2檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSmicrotubule-associated protein 2
蛋白檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSNephrin
腎上腺髓質(zhì)素檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSadrenomedullin
腎素活性檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSPlasma renin activity
生長激素釋放肽ghrelin檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: L15:LeibovitzMedium20%FBSgrowth hormone releasing peptide-Ghrelin
生長激素釋放因子檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)20%FBSgrowth hormonere-leasing factor
生長調(diào)節(jié)致癌基因β;黑素瘤生長激因子檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;0.05mM2-mercaptoethanol+0.4mg/mlG418growth-regulated oncogeneβ;melanoma growth stimulating activity
生長停滯基因6檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSGas6
生長相關(guān)蛋白43檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBSgrowth-associated protein 43
生長因子受體結(jié)合蛋白2檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)15%FBSGrowth Factor Receptor Bound Protein 2
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1異牡荊苷29702-25-8中文別名:異牡荊素;異牡荊黃素
英文名:Isovitexin
CAS登錄號(hào):29702-25-8
分子式:C21H20O10
分子量:432.38
分子結(jié)構(gòu):
外觀:黃色狀干粉
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源:小葉榕葉,來源于??崎艑僦参镩艠洌?/font>Ficus microcarpa L.f.)的葉。
溶解性:不溶于冷水,微溶于熱水、乙醇。
熔點(diǎn):228℃
旋光度:-7.9°(水溶液)
藥理藥效:主要用于治療哮喘和慢性支氣管炎,在治療心血管疾病、抗炎、抑菌等方面也都有顯著的效果。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。