綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
蝙蝠蛾擬青霉菌 | Paecilomyc | EY-J963635 |
資源名稱(chēng): 蝙蝠蛾擬青霉菌
種屬: Paecilomyces hepialus Chen & Dai
分離基物: 幼蟲(chóng)
提供形式: 斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: PDA: 馬鈴薯煮液 1.0L,葡萄糖 20.0g,瓊脂 15.0g,自然pH 。121℃,15min滅菌。馬鈴薯煮液:稱(chēng)取200g去皮的馬鈴薯塊,沸水煮30min,收集濾液定容至1.0L。
生長(zhǎng)條件: 25-28℃,好氧
存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線(xiàn)菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線(xiàn)菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線(xiàn)菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
Photobacrium│profundum 中文名稱(chēng):深海發(fā)光桿菌Photobacrium│profundum分離基物:海底表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的抗污損活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:467生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Vibrio│tubiashii 中文名稱(chēng):塔氏弧菌Vibrio│tubiashii分離基物:玻璃板上7天后形成的生物膜提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:pontial antifouling 潛在的抗污損活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:467生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Pseudomonas│migulae 中文名稱(chēng):米氏假單胞菌Pseudomonas│migulae分離基物:土壤/海沙提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:端微生物/耐冷菌;產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)脂肪酶;潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油降解菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:5℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Pseudorhodobacr│ferrugineus 中文名稱(chēng):鐵銹色假紅桿菌Pseudorhodobacr│ferrugineus分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:端微生物/耐冷菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:15℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Shewanella│frigidimarina 中文名稱(chēng):冷海希瓦氏菌Shewanella│frigidimarina分離基物:樣/海提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:端微生物/耐冷菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:20℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Alromonas│fuliginea 中文名稱(chēng):閃爍交替單胞菌Alromonas│fuliginea分離基物:樣/海提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:端微生物/耐冷菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:20℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Shewanella│livingstonensis 中文名稱(chēng):利文斯頓島希瓦氏菌Shewanella│livingstonensis分離基物:樣/海冰提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:端微生物/耐冷菌;產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)明膠酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:15℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Erythrobacr│vulgaris 中文名稱(chēng):普通赤細(xì)菌Erythrobacr│vulgaris分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:大洋細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
蝙蝠蛾擬青霉菌phospho-P53 (Ser9) 磷化腫瘤抑制基因P53抗體朝藿定A3-氨基-5-吡Human GLP-2 (Glucagon Like Peptide 2) ELISA Kit
phospho-P53 (Thr18) 磷化腫瘤抑制基因P53抗體朝藿定B3,5-二叔丁基溴苯Human JAK2 (Janus Kinase 2) ELISA Kit
phospho-P53 (Thr81) 磷化腫瘤抑制基因P53抗體朝藿定C3,5-二叔丁基溴苯Human CA242 (Pancreatic Carcinoma Markers-CA242) ELISA Kit
phospho-p53BP1(Ser25/29) 磷化p53結(jié)合蛋白1抗體3,5-二叔丁基溴苯Human PTF1α (Pancreas Specific Tranion Factor 1α) ELISA Kit
WIG-1 p53活化基因608單克隆抗體芒柄花黃素乙4-(二乙氨基)-2-丁炔酯Human REG1α (Regenerating Islet Derived Protein 1 Alpha) ELISA Kit
PAG608 p53活化基因608單克隆抗體擬人參皂苷F11乙4-(二乙氨基)-2-丁炔酯Human REG4 (Regenerating Islet Derived Protein 4) ELISA Kit
PAG608 p53活化基因608單克隆抗體人參皂苷Rb1磷化銦Human SULT1A1 (Sulfotransferase 1A1) ELISA Kit
p58ipk p58ipk抗體人參皂苷Rb2纖維五糖Human PL (Pancreatic Lipase) ELISA Kit