產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
細(xì)胞名稱 成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2
形態(tài)特性: 上皮樣;多角形
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞是FoghJ和TrempeG分離和鑒定的眾多人類腫瘤細(xì)胞系中的一種;該細(xì)胞來(lái)自一位11歲的白人女性的骨肉瘤組織?;颊呓?jīng)過(guò)放療以及氨甲喋呤、、長(zhǎng)春新堿、和aramycin-C等多種藥物治療。該細(xì)胞在免疫抑制小鼠中不致瘤,細(xì)胞表達(dá)表皮生長(zhǎng)因子EGF受體、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(1型和2型)受體。
培養(yǎng)條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)15%FBS
傳代方法: 1:2~1:4傳代;每周1~2次。
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 培養(yǎng)法(-) ?
產(chǎn)品名稱 | 成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
貨號(hào) | EY-X63227 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
fontislapidosi3,3',4,4'-聯(lián)苯四甲酸二酐Human PWP2 ELISA Kit
腮腺囊癌拉丁屬名: Pseudomonas simiae3,3',4,4'-聯(lián)苯四甲酸二酐Human RABGAP1L ELISA Kit
下頜下腺拉丁屬名: Halobacillus salinus3,3',4,4'-聯(lián)苯四甲酸二酐Human PCK2(Phosphoenolpyruvate carboxykinase [GTP], mitochondrial) ELISA Kit
腮腺上皮拉丁屬名: Flexibacter tractuosus3,3'4,4'-二苯甲酮四羧酸二酐Human CYP27B1(25-hydroxyvitamin D-1 alpha hydroxylase, mitochondrial) ELISA Kit
L-CELLS L注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用3,3'4,4'-二苯甲酮四羧酸二酐Human RABGEF1 ELISA Kit
大鼠腺癌拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis3,3'4,4'-二苯甲酮四羧酸二酐Human PYGO2 ELISA Kit
人導(dǎo)管癌拉丁屬名: Amycolatopsis japonicaN-甲基二烯基Human PWP2 ELISA Kit
人肺腺癌拉丁屬名: Avian adenovirus 5N-甲基二烯基Human PYCR1 (Pyrroline-5-carboxylate reductase 1, mitochondrial)ELISA Kit
小鼠支持上皮拉丁屬名: Aspergillus aureolus2-氨基-3,5-二溴吡Human PXMP2 ELISA Kit
上頜牙齦癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌用途: 固氮2-氨基-3,5-二溴吡Human PYCR2 ELISA Kit
人髓核注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用2-氨基-3,5-二溴吡Human PTGES3(Prostaglandin E synthase 3) ELISA Kit
大鼠星形膠質(zhì)用途: 固氮。5-氨基Human QKI ELISA Kit
小鼠腎小球內(nèi)皮拉丁屬名: Algoriphagus antarcticus5-氨基Human
成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(smActinin-α)ELISA試劑盒ADELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒ADH/VP/AVPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠(SS)ELISA試劑盒ADH/VP/AVPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒ADHELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒ADMAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠碳酐酶(CA)ELISA試劑盒ADMELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒ADMELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒ADMELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。