綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強,培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內,菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
規(guī)格參數(shù):
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌 | Burkholder | EY-J963799 |
資源名稱: 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌
種屬: Burkholderia gladioli
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: yes
應用領域: 模式菌株
培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。
生長條件: 30℃,好氧
存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-鈉鹽 有效期: 3年溶解性: 50 mg/mlWar英文名稱: Sodium 3-(N-ethyl-3-methylanilino)-2-hydroxypropanesulfonaCAS: 82692-93-1
Mifepristone 米非司有效期: 2年英文名稱: MifepristoneCAS: 84371-65-3儲存條件: 2-8℃
DL-英文名稱: DL-TartaricacidCAS: 133-37-9分子式: C4H6O6分子量: 150.087
四丁基磷氫銨有效期: 2年溶解性: 100mg/ml in War英文名稱: trabutylammonium phospha CAS: 5574-97-0
Room Cleaner 細胞房除菌劑英文名稱: Room Cleaner單位:
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌phospho-CBL2(Tyr731) /FITC 熒光素標記磷化原癌蛋白CBL2抗體IgG抗3抗體3,4-二磺酰Mouse TFF2 (Trefoil Factor 2) ELISA Kit
phospho-CBL2(Tyr774) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化原癌蛋白CBL2抗體IgG人血清白蛋白單克隆抗體3,4-二磺酰Mouse TFF3 (Trefoil Factor 3, Intestinal) ELISA Kit
CBP/FITC 熒光素標記CREB結合蛋白抗體IgG載脂蛋白A4抗體2,3-二苯甲酰Mouse TNNI3/cTn-I (Troponin I Type 3, Cardiac) ELISA Kit
CBX3/FITC 熒光素標記染色盒同源物3抗體IgG磷化Rho鳥苷交換因子2抗體2,3-二苯甲酰Mouse TRY (Trypsin) ELISA Kit
CBX5/FITC 熒光素標記CBX5抗體IgG磷化絲狀肌動蛋白結合蛋白抗體2',6'二-3'-苯乙Mouse TAP (Trypsinogen Activation Peptide) ELISA Kit
Cbx8/FITC 熒光素標記染色質結合蛋白Cbx8抗體IgG肌動蛋白相關蛋白2/3亞型1A抗體2',6'二-3'-苯乙Mouse TUBa3C (Tubulin Alpha 3c) ELISA Kit
CC16/FITC 熒光素標記克拉拉細胞蛋白(Clara細胞分泌蛋白)抗體IgG錨蛋白重復結構域蛋白32抗體2,4-二-3,5-二硝基苯Mouse TUBb (Tubulin Beta) ELISA Kit
CCK8/FITC 熒光素標記膽囊收縮素/縮膽囊素抗體(八肽)共濟失調7樣蛋白3B抗體2,4-二-3,5-二硝基苯Mouse TPPP (Tubulin Polymerization Promoting Protein) ELISA Kit