綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強,培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
渾濁紅球菌說明書 | Rhodococcu | EY-J963796 |
資源名稱: 渾濁紅球菌
種屬: Rhodococcus opacus
分離基物: 煤氣廠土壤樣品
提供形式: 凍干粉
安全等級: 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: NB
生長條件: 28℃,48H,鏡檢為陽性條狀菌,純。
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
QAE-葡聚糖凝膠A-25有效期: 1年英文名稱: Sephadex A-25儲存條件: RT單位: 瓶
聯(lián)單乙別名: 聯(lián)單乙;4-乙?;?lián),4-基乙,4-聯(lián)乙,聯(lián)乙英文名稱: 4-Acetyl-biphenylCAS: 92-91-1分子式: C9H10O3
溴化鋰,一水有效期: 2年英文名稱: Lithium bromide monohydraCAS: 23303-71-1儲存條件: RT
CM-葡聚糖凝膠C-50有效期: 1年英文名稱: Sephadex C-50儲存條件: RT單位: 瓶
大孔吸附樹脂 D-315單位: 瓶其它:
渾濁紅球菌說明書Caspase-13/FITC 熒光素標記半胱胺蛋白酶蛋白-13抗體IgGalpha 1腎上腺素能受體A抗體四氮唑Mouse TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit
Phospho-Caspase-9 (Thr125) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體2--6-甲基-3-吡甲Mouse t-PA (Tissue-type Plasiminogen Actilyse) ELISA Kit
Alpha-Catenin/ Alpha-cats /FITC 熒光素標記α-連環(huán)蛋白抗體(α-α鏈接素)IgG活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體2--6-甲基-3-吡甲Mouse TLR9 (Toll-like Receptor 9) ELISA Kit
Beta-catenin/ Beta-cats /FITC 熒光素標記 β-連環(huán)蛋白抗體IgG血管緊縮素樣蛋白1抗體2--6-甲基-3-吡甲Mouse FBXO32 (F-Box Protein 32) ELISA kit
Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化β 連環(huán)素蛋白抗體IgG自噬相關(guān)蛋白7抗體2--5-苯甲Mouse CD8 (Cluster of Differentiation 8) ELISA Kit
p- Beta catenin/FITC 熒光素標記磷化β-連環(huán)蛋白抗體IgG炭疽素受體2抗體2--5-苯甲Mouse MuRF1 (muscle-specific RING-finger protein 1) ELISA kit
Phospho- Beta-Catenin (Ser45)/FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化β 連環(huán)素蛋白抗體IgG自噬相關(guān)蛋白4C抗體7--1,5-苯并二氧雜環(huán)庚烷-3-Mouse Toxoplasma IgA antibody ELISA Kit
Phospho- Beta-Catenin (Ser552) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化β 連環(huán)素蛋白抗體IgG自噬蛋白5/細胞凋亡的特異性蛋白抗體-1,5-苯并二氧雜環(huán)庚烷-3-Mouse Toxoplasma IgD antibody ELISA Kit