公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
樹(shù)鼩肌肉成纖維樣細(xì)胞;TSHR1 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63813 |
細(xì)胞名稱(chēng) 樹(shù)鼩肌肉成纖維樣細(xì)胞;TSHR1
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性樹(shù)鼩的肌肉組織。2003年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P4
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HT-29形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Nerve growth factor receptor
HIV (1+2) 抗原抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 小鼠淋巴瘤細(xì)胞;EL4形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣HIV (1+2) antigen&antibody
脂肪分化相關(guān)蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;DMS153[DMS153]形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣adipose differentiation-related protein
鈣;鈣調(diào)蛋白依賴(lài)性蛋白激酶1D檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 小鼠成肌細(xì)胞;C2C12形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Calcium,calmodulin-dependent protein kinase type 1D
熱休克70kDa蛋白12A檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞之融合細(xì)胞;NG108-15[108CC15]形態(tài)特性: 多形細(xì)胞樣Heat Shock 70kDa Protein 12A
磷甘油變位酶5檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣phosphoglycerate mutase 5
組氨檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1形態(tài)特性: 單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞樣histidine
單純皰疹病1抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人前列腺正常細(xì)胞;RWPE-2形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Herpes simplex virus 1 Antibody
脂聯(lián)素β樣1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 小鼠小腦組織細(xì)胞;C8-D1A形態(tài)特性: 神經(jīng)元樣Integrin Beta-Like Protein 1
胰島素細(xì)胞抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C形態(tài)特性: 內(nèi)皮細(xì)胞樣islet cell autoantibodies
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人男性正常細(xì)胞;Hs68形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Neuregulin 4
抗膽能受體M2抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 犬腎細(xì)胞系/IgR;MDCK/IgR形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣anti-M2-cholinergic receptor antibodies
CD64分子檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Cluster of differentiation 64
磷乙醇磷酶檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Ethanol Phosphate Acid Phosphatase
瘧疾抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgR;VERO/IgR形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞Malaria antibody
瘧疾IgG抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞Malaria IgG antibody
腸道病71型VP1蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞Enterovirus 71 Capsid Protein Vp1
樹(shù)鼩肌肉成纖維樣細(xì)胞;TSHR1MKTTn 肉湯規(guī)格:250g用途:用于食品中沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌(ISO標(biāo)準(zhǔn))
硫亞鐵瓊脂規(guī)格:250g用途:用于腸桿菌科細(xì)菌的硫化氫試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
梭菌增菌培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
抗生素檢定培養(yǎng)基Ⅰ(PH7.8-8.0)規(guī)格:BR250g詳情介紹
吐溫稀釋液規(guī)格:250g用途:用于樣品制備水稀釋
卻普曼瓊脂規(guī)格:250g用途:用于檢測(cè)金黃色葡萄球菌
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。