綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
?
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
克雷伯氏菌屬說明書 | Klebsiella | EY-J963808 |
資源名稱: 克雷伯氏菌屬
種屬: Klebsiella sp.
分離基物: 西沙諾尼成熟果內(nèi)
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: LB
生長條件: 28℃,好氧,24h,鏡檢為陰性短桿菌。菌種純
存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達(dá)3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
化亞錫(二水合物)有效期: 3年級別: AR別名: 化亞錫結(jié)晶英文名稱: Tin (II) chloride dihydra
植鈣有效期: 2年別名: 菲酊 菲汀 肌醇六磷鈣鎂英文名稱: Calcium phytaCAS: 3615-82-5
三羧草醚有效期: 2年級別: CP別名: 5-(2--4-基氧基)-2-硝基甲 雜草焚英文名稱: Acifluorfene
DL-蘋果 二鈉鹽級別: AR溶解性: 100mg/ml in War有效期: 1年別名: DL-蘋果二鈉 馬來鈉
甜蜜素有效期: 3年級別: High Pure Grade來源: 合成別名: 環(huán)己基氨基磺鈉
愈創(chuàng)木酚有效期: 5年級別: CP英文名稱: 2-MethoxyphenolCAS: 90-05-1
8-羥基喹啉鹽有效期: 3年別名: -8-羥基喹啉;氧化喹啉;奎諾蘇; 8-Hydroxyquinoline hemisulfa salt Oxyquinoline sulfa; 8-Quinophenol sulfa;Oxine sulfa英文名稱: 8-Hydroxyquinoline sulfaCAS: 134-31-6
麥芽酚有效期: 2年溶解性: 30mg/ml EtOH別名: 甲基麥芽酚;2-甲基-3-羥基-4-吡喃;3-羥基-2-甲基-4-吡喃英文名稱: 3-Hydroxy-2-methyl-4H-pyran-4-one
克雷伯氏菌屬說明書CD23/Fc EpsilonR II /FITC 熒光素標(biāo)記CD23抗體IgG性亮氨拉鏈蛋白BZW1抗體3-巰基甲酯Mouse PS1 (Presenilin 1) ELISA Kit
CD24/FITC 熒光素標(biāo)記CD24蛋白抗體IgG骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體3-巰基甲酯Mouse AgRP (Agouti Related Protein) ELISA Kit
CD25/IL-2RA/FITC 熒光素標(biāo)記CD25/白介素2-受體抗體IgGBcl2相互作用蛋白1抗體(轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白)6-甲氧基-2-并噻唑Mouse PACAP-38 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit
CD26/ADCP2/DPP IV /FITC 熒光素標(biāo)記CD26抗體IgG骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體2-氨基-5-甲Mouse PACAP-27 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 27) ELISA Kit
CD27/TNFRSF7/FITC 熒光素標(biāo)記CD27抗體IgG骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體2-氨基-5-甲Mouse CH (Cholesterol) ELISA Kit
CD28/FITC 熒光素標(biāo)記CD28蛋白抗體IgGBcl-2樣蛋白2抗體2-氨基-5-甲Mouse PGF2α (Prostaglandin F2 Alpha) ELISA Kit
Integrin Beta1/CD29(integrin beta 1)/FITC 熒光素標(biāo)記整合素β1蛋白抗體IgG殺菌/通透性增強(qiáng)蛋白抗體全丁基磺Mouse AMPK (Phosphorylated Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase) ELISA Kit
CD30/TNFRSF8/FITC 熒光素標(biāo)記CD30抗體IgGBcl-2抗體全丁基磺Mouse G6PC (Glucose-6-Phosphatase, Catalytic) ELISA Kit