白三烯D4Elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法
白三烯D4Elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠白三烯D4(LTD4)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠白三烯D4(LTD4)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
一、白三烯D4Elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1.血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3.細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量SHEGN理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5.保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
二、白三烯D4Elisa試劑盒保存:
1.所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃。
2.使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
3.試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸,按實(shí)驗(yàn)需求可分多次使用。使用后的剩余試劑盒建議在實(shí)驗(yàn)后1個(gè)月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
三、白三烯D4Elisa試劑盒注意事項(xiàng)
1.于2-8℃保存,有效期6個(gè)月。每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。
2.中終止液具有腐蝕性,要小心使用。
3.未使用完的板條應(yīng)密封保存。
4.瓶蓋每次使用后要擰緊,各瓶蓋之間不可混用。不同批號(hào)試劑盒的試劑組份不可混用。
5.白三烯D4Elisa試劑盒試驗(yàn)樣本應(yīng)為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。
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