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人可溶性CD40配體(sCD40L)免疫組化試劑盒?操作步驟

點(diǎn)擊次數(shù):633 更新時(shí)間:2021-11-11

人可溶性CD40配體(sCD40L)免疫組化試劑盒操作步驟:


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

BAF53b肌動(dòng)蛋白樣蛋白6B抗體

Ataxin 7脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白7抗體

phospho-c-Abl (Tyr70)磷酸化非受體激酶c-Abl抗體

APBA1β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體(X11α)

Apolipoprotein E載脂蛋白E抗體

AFP甲胎蛋白AFP抗體

AE2陰離子交換蛋白2抗體

Aconitase 1鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體

ATAD3A三磷酸腺苷酶家族蛋白3A抗體

APOJ載脂蛋白J抗體

APOH載脂蛋白H抗體

ART4二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶4抗體

AKIRIN2AKIRIN2蛋白抗體

ARL8BADP核糖基化樣因子8B抗體

ATAD2三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗體

AKIRIN1AKIRIN1蛋白抗體

ASZ1錨定蛋白樣蛋白1抗體

Adenylate kinase 2腺苷酸激酶2抗體

AIM1L黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體

AER61未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體

FE65鐵蛋白Fe65抗體

ARHI抑癌基因ras同源家族1抗體

AP2 alpha轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體

ANP心鈉素抗體

AARS2丙氨酰tRNA合成酶2抗體

AKAP12抑制蛋白激酶C底物抗體

Alpha-Synuclein核突觸蛋白α抗體

APG4B自噬相關(guān)蛋白4B抗體

ADAMTS12整合素樣金屬蛋白酶與1型-12抗體

alpha Actinin 4-Loading Controlα-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體

Alkaline Phosphatase堿性磷酸酶抗體

AU1 tagAU1 tag標(biāo)簽抗體

AEBP1脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1

AKT1蛋白激酶B

AKT1蛋白激酶B

ANGL2血管生成素樣蛋白2抗體

Angiopoietin 4血管生成素3/血管生成素4抗體

Annexin I膜粘連蛋白 I抗體


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