小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)elisa檢測試劑盒?實驗洗滌方法
小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)elisa檢測試劑盒實驗洗滌方法:
1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E
表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET
表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293 001A
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293 001B
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293sars181A
人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)
人胚腎細胞;293FT
人整合SV40基因的乳腺上皮細胞;HBL-100 [HBL100]
人胚腎細胞-F克??;293F
SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞;PUMC-HUVEC-T1
人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞;CGM1
人整合SV40基因的乳腺上皮細胞;HBL-100 [HBL100]
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;AAV-293
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細胞;hFOB 1.19
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;293T
人胚腎細胞;293 Cells, low passage
人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞;WPMY-1
人肝永生化細胞;THLE-3
人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17
人膀胱上皮永生化細胞;SV-HUC-1
人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293 Ad5
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM932
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞(彝族);KM934
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞(傣族);KM9403
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞(傣族);KM9405
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞(拉祜族);KM9406
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞(彝族);HYL
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM933
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM9401