CRF elisa酶聯(lián)免疫試劑盒(間接法)步驟
CRF elisa酶聯(lián)免疫試劑盒(間接法)步驟:
(1) 抗原包被:用包被液將PEDV抗原作1∶5稀釋包被反應板,每孔100μl,同時設陰性細胞培養(yǎng)物對照孔,置4℃過夜。
(2) 洗滌:用洗滌液洗滌2次,每次2min,瀝干。
(3) 加入被檢血清:用保溫液將被檢血清作1∶100稀釋,加入反應板相鄰的兩個孔中,每孔100μl。同時作陰、陽性標準血清對照,置37℃孵育1h。
(4) 洗滌3次:方法同上。
(5) 加入酶結合物:用保溫液將酶結合物作1∶4 000稀釋,加入反應孔中,每孔100μl,置37℃孵育1h。
(6) 洗滌3次:方法同上。
(7) 加入底物:每孔100μl,置室溫暗盒內(nèi)顯色20min。
(8) 加入終止液:每孔50μl,靜置5min。
(9) 測定OD值:用檢測儀,于492nm波長,按儀器使用及制定標準要求調(diào)節(jié)儀器,測定各反應孔的OD值,記錄結果。
試劑使用須知:
(1)請參照相關法規(guī)、文獻、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進行安全操作。
(2)通常購買試劑時一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。
(3)萬一試劑操作者并非專業(yè)技術人員。必須在專業(yè)人士的指導監(jiān)督下進行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應按照相關法律法規(guī)正當處理。
(4)購買后,請務必確認標簽上的注意事項;做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認標簽上的注意事項,做好必要的安全對策;對沒有標明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進行操作;必須帶好防護用具,小心翼翼進行操作。
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