黃熱病病毒PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)的特異性
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1.引物與模板DNA特異正確的結(jié)合。
2.堿基配對(duì)原則。
3. Tag DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性。
4.靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及 Tag DNA聚合醇耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大増加加,被擴(kuò)増的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。