ELISA實(shí)驗(yàn)正面解析血清學(xué)反應(yīng)的特點(diǎn)原理
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)正面解析血清學(xué)反應(yīng)的特點(diǎn)
原理:
抗原和相應(yīng)抗體之間在一定條件下可發(fā)生免疫學(xué)反應(yīng)。在體外,抗體主要存在于血清中,因此抗原和抗體之間發(fā)生特異性結(jié)合的反應(yīng)又稱為血清學(xué)反應(yīng)
(一)血清學(xué)反應(yīng)的一般特點(diǎn)
1、抗原抗體的結(jié)合具有特異性
在血清學(xué)反應(yīng)中,只有抗原(或抗體)和相應(yīng)的抗體(或抗原)才能結(jié)合。
2、抗原抗體是分子表面的結(jié)合
抗原抗體發(fā)生結(jié)合后,復(fù)合物相當(dāng)穩(wěn)定,但是有可逆性。經(jīng)分離后重新得到的抗原或抗體的性質(zhì)仍不改變。
3、抗原抗體按一定的分子比例結(jié)合
只有在分子比例合適時(shí)才會(huì)出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。若兩者比例不合適,即抗體過(guò)剩或抗原過(guò)剩,都不能形成大塊復(fù)合物,因而不能出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。在結(jié)合中,一般認(rèn)為抗原是多價(jià)的,抗體是二價(jià)的。
4、抗原抗體反應(yīng)分為兩個(gè)階段
*階段為抗原決定簇與抗體的結(jié)合部位發(fā)生特異性反應(yīng),形成復(fù)合物。這個(gè)階段具有特異性。其特點(diǎn)是反應(yīng)快,數(shù)秒鐘至數(shù)分鐘內(nèi)即可完成,但不被肉眼所見(jiàn)。
第二階段為抗原抗體反應(yīng)的可見(jiàn)階段,是非特異性的。這一階段由于電解質(zhì)的作用,中和了抗原抗體復(fù)合物表面上的大部分電荷,使許多復(fù)合物能相互聚集成較大的顆粒而出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。這一階段反應(yīng)較慢,常需數(shù)分鐘乃至十幾小時(shí)才能完成。受到電解質(zhì)、pH和溫度的影響。
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