大鼠Elisa試劑盒實驗不會失利的經(jīng)驗
在大鼠Elisa試劑盒操作過程中總是會呈現(xiàn)或大或小的問題,比如說花板、假陽性、全顯色、信號值比空白還低等等。今日上海一研為咱們帶來了一些實驗經(jīng)驗總結(jié),教您這樣操作ELISA試劑盒實驗不會失利。
1.有的包被原可能不是蛋白,關(guān)于和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)咱們要事前對其改造再加以包被,我把辦法簡明的列出如下:
2.親和素:先親和素先包被載體,參加化的DNA,這種包被辦法均勻、結(jié)實,已擴展應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。
3.小分子必需依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才干固定在固相載體上。包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這到你做出的抗體可不能夠 被其辨認,所以保存抗原很重要,我做重組蛋白時,師兄都嚴格正告我必定要在冰浴下緩慢消融就是這個道理。
4.脂類物質(zhì):可將其在有機溶劑中溶解后參加Elisa板孔中,開蓋置冰箱過夜或涼風(fēng)吹干,待酒精蒸發(fā)后,讓脂質(zhì)天然干固在固相外表。
5.在洗板時會有必定誤差,人為因素很大(當然有條件的用洗板機在外),洗的不*或串了孔,對如斯敏捷的ELISA體系但是不小的影響。由于 聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,為到達別離游離的和結(jié)合的酶符號物的意圖,鏟除殘留在板孔中游離的物質(zhì),以及非特異性地吸附的干 擾物質(zhì),在洗刷時又應(yīng)把這種非特異性吸附的攪擾物質(zhì)洗刷下來。洗刷板:能夠說在ELISA操作中,洗刷是zui首要的紐帶技能。