大鼠Elisa試劑盒檢測(cè)樣本類型的多種化
一般咱們可用于大鼠Elisa試劑盒檢測(cè)的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或安排勻漿液等,不同類型的檢測(cè)樣本前期的處理辦法是不一樣的。正確的處理樣本是確保ELISA檢測(cè)的正確性和準(zhǔn)確性的*步,下面簡(jiǎn)略介紹一下不同類型的樣本的處理辦法。
細(xì)胞裂解液
1) 吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,用消化細(xì)胞,加適量培養(yǎng)基將細(xì)胞從培養(yǎng)板上吹下來。懸浮細(xì)胞可省掉。
2) 搜集細(xì)胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預(yù)冷的PBS潤(rùn)洗3次。
3) 參加適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前參加蛋白酶按捺劑)重懸細(xì)胞。一般6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞量需求150~250μL PBS重懸。
4) 將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫凍結(jié)樣品,重復(fù)凍融幾回,使細(xì)胞充沛裂解。也可將樣品進(jìn)行超聲破碎,以到達(dá)裂解的意圖。
5) 4℃ 10000×g 離心10min,除掉細(xì)胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,防止重復(fù)凍融。
5、安排勻漿液
1) 將安排樣本用PBS (0.01錨點(diǎn)錨點(diǎn)M, PH 7.4) 沖刷,洗去安排表面殘留的血液或雜質(zhì)。
2) 將安排塊稱重,記錄后剪碎,碎塊應(yīng)盡量小,便于勻漿得更充沛
3) 將安排按必定的份額參加預(yù)冷的PBS(臨用前參加蛋白酶按捺劑)勻漿,勻漿時(shí)置于冰上或冰浴中。(一般按安排分量:PBS體積=1:9的份額勻漿,例如1g的安排樣本對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求恰當(dāng)調(diào)整,檢測(cè)后核算樣品濃度時(shí)應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù))
4) 汲取勻漿液到離心管,4℃ 5000×g 離心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,防止重復(fù)凍融。
6、 尿液、唾液等其他液體生物樣本
1000×g離心20min,取上清即可檢測(cè)。
總的來說,由于ELISA只能檢測(cè)可溶性蛋白的含量,所以應(yīng)確保一切樣本均為弄清的液體,沉積或懸浮物都應(yīng)離心去除。
為了確保大鼠Elisa試劑盒檢測(cè)的準(zhǔn)確性,保存于-20℃或-80℃的樣本在1~6個(gè)月內(nèi)檢測(cè);4℃保存的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。別的,還應(yīng)確保樣本不含NaN3,由于NaN3會(huì)按捺HRP的活性,然后導(dǎo)致假陰性的成果。
PLGF/PIGF (human) 白介素8抗體
PLGF/PIGF (mouse, rat, pig) 白介素7抗體
PLK1/STPK13 白介素6抗體(大、小鼠)
PML/TRIM19 白介素6抗體
PMP2 白介素6(人)
PMP22 白介素-5受體α鏈抗體
PMS2 白介素4抗體(人)
PMSA/FOLH1 白介素4抗體(大、小鼠)
PNAT/NAT2 白介素3抗體
PNK1/PNKP 白介素33抗體
PNMT 白介素33抗體
大鼠Elisa試劑盒