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技術(shù)文章   Article首頁(yè)>>技術(shù)文章>>17羥孕酮Elisa試劑盒的細(xì)節(jié)處理

17羥孕酮Elisa試劑盒的細(xì)節(jié)處理

點(diǎn)擊次數(shù):891 更新時(shí)間:2017-12-05

由于17羥孕酮Elisa試劑盒只能檢測(cè)可溶性蛋白的含量,所以應(yīng)保證所有樣本均為澄清的液體,沉淀或懸浮物都應(yīng)離心去除。為了保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性,保存于-20℃或-80℃的樣本在1~6個(gè)月內(nèi)檢測(cè);4℃保存的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。另外,還應(yīng)保證樣本不含NaN3,因?yàn)镹aN3會(huì)抑制HRP的活性,從而導(dǎo)致假陰性的結(jié)果。

細(xì)胞裂解液的細(xì)節(jié)處理:
  1. 吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,用消化細(xì)胞,加適量培養(yǎng)基將細(xì)胞從培養(yǎng)板上吹下來(lái)。懸浮細(xì)胞可省略。
  2. 收集細(xì)胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預(yù)冷的PBS潤(rùn)洗3次。
  3. 加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞。通常6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞量需要150~250μL PBS重懸。
  4. 將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復(fù)凍融幾次,使細(xì)胞充分裂解。也可將樣品進(jìn)行超聲破碎,以達(dá)到裂解的目的。
  5. 4℃10000×g離心10min,除去細(xì)胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
·腫瘤壞死因子ELISA試劑盒組織勻漿液的細(xì)節(jié)處理:
  1. 將組織樣本用PBS(0.01M, PH 7.4)沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。
  2. 將組織塊稱重,記錄后剪碎,碎塊應(yīng)盡量小,便于勻漿得更充分
  3. 將組織按一定的比例加入預(yù)冷的PBS(臨用前加入蛋白酶抑制劑)勻漿,勻漿時(shí)置于冰上或冰浴中。
  4. 17羥孕酮Elisa試劑盒吸取勻漿液到離心管,4℃5000×g離心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
Protopanaxdiol    30636-90-9    原人參二醇    20mg/支
Protopanaxatriol    1453-93-6    原人參三醇    20mg/支
Panaxadiol    19666-76-3    人參二醇    20mg/支
Panaxatriol    32791-84-7    人參三醇    20mg/支
Ciwujianoside B    114902-16-8    刺五加皂苷B    20mg/支
Syringin    118-34-3    紫苷    20mg/支
Eleutheroside E    39432-56-9    刺五加苷E    20mg/支
Raddeanin A    89412-79-3    竹節(jié)香附素A    20mg/支
Hederasaponin B    36284-77-2    刺五加葉中    20mg/支
Saikosaponin A    20736-09-8    柴胡皂苷A    20mg/支
17羥孕酮Elisa試劑盒

 

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