偽劣17羥孕酮Elisa試劑盒的辨別方法
Ⅰ. 17羥孕酮Elisa試劑盒利用干擾實驗即可辨別17羥孕酮Elisa試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:
(1)將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵
育液
(2)37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體
(3)后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物
(4)實驗完畢后,檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑
盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造17羥孕酮Elisa試劑盒。
(5)如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的
檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。
Ⅱ.如果購買了兩盒同一公司的17羥孕酮Elisa試劑盒A和B,利用交叉實驗即可辨別17羥孕酮Elisa試劑盒是否造假,方法如下
(1)取出購買的試劑盒A的包被板兩條。
(2)一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(3)另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(4)后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物。
(5)實驗完畢后,檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指
標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造17羥孕酮Elisa試劑盒。
(6)如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個17羥孕酮Elisa試劑盒檢測的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測A,不能檢測
B,即該試劑盒為正常的17羥孕酮Elisa試劑盒。