大鼠白介素1β (IL-1β)試劑盒正確的操作方法
17羥孕酮Elisa試劑盒操作步驟
1. 標準品的稀釋:本大鼠白介素1β (IL-1β)試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
40 ng/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
20 ng/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
10 ng/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
5 ng/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2.5 ng/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
待測樣品孔。17羥孕酮Elisa試劑盒在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,
然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水20 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此
重復5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 大鼠白介素1β (IL-1β)試劑盒顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 17羥孕酮Elisa試劑盒測定應在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進行。