培養(yǎng)基品類大全
1、營養(yǎng)瓊脂(普通瓊脂)
成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏湯) 100毫升
瓊脂(視天氣,瓊脂質(zhì)量而定)
制法:將上物加熱溶解,補足水,調(diào)ph至7.6,過濾分裝121℃,高壓滅菌15分鐘。
用途:作普通瓊脂平皿。
2、血瓊脂平板(BA)
制法:取營養(yǎng)瓊脂(PH7.6),加熱使其溶解待冷至45-50℃,以滅菌操作于每100毫升營養(yǎng)瓊脂加滅菌脫纖維羊血或兔血5-10毫升,輕輕搖勻,立即傾注于平板或分裝試管,制成斜面?zhèn)溆谩?br />用途:1. 一般棉拭子均接種此培養(yǎng)基。
2.尿液,膿液
3.分離細菌標(biāo)本用。
3、基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (肉膏湯BB)
成份:蛋白胨 10克 牛肉膏 5克
氯化鈉 5克 水 1000毫升
制法:將以上各物稱好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,過濾分瓶,121℃高壓滅菌,20分鐘備用。
用途:1 作耐藥試驗,增菌用分裝小管。
2 作普通瓊脂斜面。
4、血液培養(yǎng)基(大管肉湯培養(yǎng)基)
成份:1 新鮮牛肉浸液 1000毫升
2 PABA(對氨基苯甲酸〔相當(dāng)于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升
3 MgSO4 [相當(dāng)于0.493/100毫升] 49.3% 1毫升
4 枸椽酸鈉 0.3g
制法:1 將1號,4號混合液,2號,3號液分裝高壓滅菌。
2 取滅菌1,4號混合液用無菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行無菌試驗三天方可使用。
用途:作血,骨髓培養(yǎng)用。
5、腸道桿菌培養(yǎng)基(伊紅美蘭瓊脂)
成份: 蛋白胨 10克 乳糖 10克
氯化鈉 5克 瓊脂 25(22)克
水 1000毫升 2%伊紅溶液20毫升
0.5%美蘭溶液 20毫升
制法:將蛋白胨,氯化鈉瓊脂稱好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4過濾,補足失水,加入2%伊紅溶液20毫升,0.5%美蘭溶液20毫升,(115℃高壓20分鐘),冷卻至50℃左右傾注平板,凝固后存冰箱備用。(高壓以后方可再加乳糖)
用途:用作分離沙門氏,志賀氏菌屬,也作菌群調(diào)查。
1
6、羅文斯坦培養(yǎng)基
成份:磷酸二氫鉀 2.4克 0.24克
枸椽酸鈉 0.6克 天門冬素 3.6克
純甘油(丙三醇) 12毫升 水 600毫升
馬鈴薯粉 30克 雞蛋 1000毫升(約3公斤)
2%孔雀綠水溶液 20毫升
制法:1 除雞蛋外(還有孔雀綠)??蓪⑵渌锲贩Q好,放入大三角瓶包扎好,高壓滅菌。
2 雞蛋用75%酒精泡30分鐘,滅菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的滅菌三角燒瓶內(nèi)充分將雞蛋搖散。
3 將各成份按比例配好,分裝每管約5毫升。
4 間歇滅菌*次90℃1小時,第二次80℃半小時,第三次80℃半小時(或放85℃烤箱內(nèi)連續(xù)二次)。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn): 1 滅菌試驗合格。
2 接種結(jié)核桿菌要求兩星期生長良好。
用途:作結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)用。
7、結(jié)核半固體培養(yǎng)基
成份: 19克 0.6克
磷酸二氫鉀 2.5克 天門冬素 5克
1%孔雀綠 1.5克 甘油 20毫升
吐溫80(10%) 5毫升 水 1000毫升
枸椽酸鈉 2.5克 動物血清 100毫升
瓊脂 1.5克(80小時用甲醇去脂)
1%孔雀綠 0.78毫升 吐溫80(10%) 5毫升
加動物血清 100毫升
制法: 1 除血清外將上述藥品均稱好,放入煮沸溶解,調(diào)PH7。2
2 分管(每管約10毫升)包扎好,高壓,121℃半小時滅菌。
3 待冷后無菌法加無菌血清(綿羊血或兔血)每管約1毫升備用。
4 去除瓊脂方法:取瓊脂若干或于三角燒瓶中加甲醇于瓊脂1毫升用塞密封,放37℃溫浴80小時,每天搖動一次,冷卻后到時取出用濾紙過濾,待瓊脂自然冷卻后備用。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1無菌實驗合格。www.med126。。com
2瓊脂硬度合適而清亮。
3接種標(biāo)準(zhǔn)結(jié)核桿菌用,強度合適即可用。
用途:培養(yǎng)結(jié)核桿菌用。
8、亞碲酸鉀血瓊脂平板
成份:瓊脂基礎(chǔ) 100毫升 1 0%葡萄糖 2毫升
1%亞碲酸鉀 4.5毫升 綿羊血 10毫升
制法:1將瓊脂基礎(chǔ)溶解好,加入羊血。
2馬上加熱使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升與1%亞碲酸4.5毫升混合后倒入無菌平板,凝固后存冰箱備用。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):接種白喉桿菌生長良好,其它革蘭氏陰性菌均抑制生長。
用途:供培養(yǎng)及鑒別白喉桿菌用。
9、米培養(yǎng)基
成份:白米 20克 水 1000毫升
瓊脂 20克 吐溫80 10毫升
制法:1將20克米加水200毫升煮沸45分鐘,煮時將容器蓋好。
2用紗布過濾,只要米湯,不要飯,加水至1000毫升。
3加瓊脂20克,吐溫-80 10毫升煮溶,分裝中型管(每管約3毫升),包扎好,高壓,121℃半小時,消毒備用。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1滅菌。
2要求清亮。
3接種白色念珠菌17-24小時生長良好,并產(chǎn)生厚膜孢子。
用途:培養(yǎng)白色念珠菌用。
10、蛋白胨水培養(yǎng)基
成份:蛋白胨 1克 氯化鈉 0.5克
水加至 100毫升 PH調(diào)至 7.8
制法:把以上各物稱好溶于水,調(diào)節(jié)PH7.6分裝消毒備用。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1 放置37℃無菌生長。
2 接種大腸桿菌24小時生長良好。
3 可作中國蘭平板基礎(chǔ)液。
可作靛基質(zhì)基礎(chǔ)液(作此試驗需要蛋白胨)。
11、血培養(yǎng)基
成份:蛋白胨 10克 牛肉膏 5克
氯化鈉 5克 葡萄糖 3克
枸椽酸鈉 3克 MgSO4。7H2O 20毫升
0.5%PABA 10毫升 酵母浸液 10毫升 0.2克(2%過濾)
*酚紅0.4% 6毫升 水 1000毫升
瓊脂 0.5克
*:作大BB,小BB時,不要加酚紅和瓊脂。
制法:1、除PABA、、酚紅外均稱好煮化調(diào)PH7.4
2、調(diào)好PH后再加酚紅。
3、、PABA另外無菌再加入(亞細,小BB)
12、沙氏培養(yǎng)基
成份:蛋白胨 1克 水 100毫升
瓊脂 1.5克(瓊脂粉1克%) 葡萄糖或麥芽糖 4克
制法:1將上述物質(zhì)稱好,放入水中煮沸溶解(不必調(diào)PH即有5左右)分中號試管(約4毫升)包扎,高壓115℃20分鐘。
2 趁熱斜好,凝固備用。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1無菌試驗合格。
2接種霉菌比在其它培養(yǎng)基上生長良好,其它菌生長不好。
用途:作分離培養(yǎng)霉菌用。
注意:1 接種臨床新鮮標(biāo)本可先加1-2滴70%酒精讓干后再接種于含12.5%沙氏斜面培養(yǎng)基上。
2 也可用蜂蜜8克代替葡萄糖或麥芽糖。
13、肉渣培養(yǎng)基
成份: 牛肉渣 牛肉浸液(牛肉膏)
制法:將做牛肉浸液的牛肉渣,裝入試管,高約3毫米,加入牛肉浸液或牛肉膏湯(PH7.6)約5毫升,比肉渣高一倍,液面上加入已溶解的凡士林,高約0.5厘米(不加也可),121℃高壓滅菌20-30分鐘后保存于冰箱內(nèi)備用 。
用途:用于厭氧菌培養(yǎng)。
注意:如無肉渣也可用牛、羊血等代替,將血塊先放入水內(nèi)煮沸,取出成小塊,血塊在加熱后搖勻成碎顆粒狀。
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