人假定蛋白LOC677168 elisa試劑盒操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2400pg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1200pg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
600pg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
300pg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150pg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠sCD40配體(mouse sCD40 Ligand)
小鼠CD34(mouse CD34)
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(mouse sCD40L)
小鼠補(bǔ)體C3a(mouse C3a)
小鼠補(bǔ)體C5a(mouse C5a)
小鼠血清總補(bǔ)體(mouse CH50)
小鼠肌酸激酶(mouse CK)
小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB)
小鼠羥甲基賴氨酸(mouse CML)
小鼠C-肽(mouse C-peptide)
小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(mouse G-CSF)
小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)
小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse M-CSF)
小鼠雙鏈DNA(mouse dsDNA)
小鼠多巴胺(mouse Dopamine)
小鼠二胺氧化酶(mouse DAO)
小鼠D-二聚體(mouse D-Dimer)
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4)
小鼠β內(nèi)啡肽(mouse β-EP)
小鼠表皮生長因子(mouse EGF)
小鼠表皮生長因子受體(mouse EGF R)
小鼠內(nèi)皮素-1(mouse Endothelin-1)
小鼠噬酸性粒細(xì)胞趨化因子(mouse Eotaxin)
小鼠促紅細(xì)胞生成素(mouse EPO)
小鼠紅細(xì)胞生成素受體(mouse EPOR)
小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(mouse ECP)