人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟
人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
核突觸蛋白α抗體Alpha-Synuclein 0.1ml
自噬相關(guān)蛋白4B抗體APG4B 0.2ml
α-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體alpha Actinin 4-Loading Control 0.1ml
堿性磷酸酶抗體Alkaline Phosphatase 0.1ml
AU1 tag標(biāo)簽抗體AU1 tag 0.1ml
脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1AEBP1 0.2ml
蛋白激酶BAKT1 0.1ml
蛋白激酶BAKT1 0.1ml
血管生成素樣蛋白2抗體ANGL2 0.1ml
血管生成素3/血管生成素4抗體Angiopoietin 4 0.1ml
膜粘連蛋白 I抗體Annexin I 0.1ml
膜粘連蛋白 Ⅱ抗體Annexin A2 0.1ml
活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體ATF1 0.1ml
水通道蛋白4抗體Aquaporin 4 0.1ml
活化復(fù)制因子2抗體ATF2 0.1ml
腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體AMPK beta 1 0.1ml
糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體Amylin 0.1ml