脆弱擬桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒操作流程
脆弱擬桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒操作流程:
1. 根據(jù)要保存的各樣本的體積,計(jì)算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍(如100mg組織約用1ml RNAwait);離心收集2×106細(xì)胞RNAwait的用量是1ml。
2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中;
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀,立即*浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過(guò)厚則RNAwait不能有效滲入,組織中間部位的RNA不能受到保護(hù)。較小的組織(如大鼠的腎臟、脾臟,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存時(shí)先將樣本浸入RNAwait后置4℃冰箱過(guò)夜(4℃過(guò)夜是必需的,這樣可使RNAwait*滲入到組織中),然后轉(zhuǎn)移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃時(shí)仍為液態(tài),有結(jié)晶析出,是正常情況);或者在4℃冰箱過(guò)夜后,從RNAwait中取出組織塊,轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的標(biāo)本,反復(fù)凍融至室溫20次不影響RNA的質(zhì)量。